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Tipo do documento: Dissertação
Título: Clonagem e expressão do hormônio de crescimento de Colossoma macropomum em Escherichia coli.
Autor: Silva, Suelen Dias da 
Primeiro orientador: Porto, Jorge Ivan Rebelo
Primeiro coorientador: Astolfi Filho, Spartaco
Primeiro membro da banca: Nozawa, Monica Stropa Ferreira
Segundo membro da banca: Silva, Carlos Gustavo Nunes da
Terceiro membro da banca: Marshall, Nislanha Ana dos Anjos
Resumo: O hormônio do crescimento é um polipeptídio essencial para o crescimento e desenvolvimento dos vertebrados. O tambaqui (Colossoma macropomum) é uma espécie de peixe amplamente distribuída na bacia amazônica, considerada como promissora para a piscicultura. Visando aplicações futuras na suplementação alimentar de peixes, este trabalho clonou e expressou o hormônio de crescimento de tambaqui (tGH), utilizando a bactéria Escherichia coli linhagem BL21 DE3 como hospedeira. Para expressão da proteína heteróloga, o gene tgh sintético (611pb) foi inicialmente clonado no vetor pUC19 e posteriormente inserido no vetor pGSM-1, construído especificamente para este trabalho, dando origem ao plasmídeo pGSM-tGH. A indução do tGH foi obtida cultivando-se células de E. coli/pGSM-tGH na presença do indutor IPTG (1 mM), sendo que o pico de expressão foi observado após 4h de indução. Os clones recombinantes expressaram uma proteína de aproximadamente 24 kDa, tamanho similar ao de outros trabalhos com GH de peixes. A obtenção do tGH recombinante foi confirmada por eletroforese em gel de poliacrilamida SDS-PAGE 15%. O tGH recombinante expresso em E. coli descrito nesse trabalho será utilizado para estudos posteriores, possibilitando a sua melhor caracterização. Por fim, o tGH recombinante deverá ser posteriormente avaliado como suplemento alimentar em ração de peixes, com intuito de proporcionar maior valor econômico à piscicultura do tambaqui.
Abstract: Growth hormone is a polypeptide essential for growth and development of vertebrates. The tambaqui (Colossoma macropomum) is a widely distributed fish species in the Amazon basin, considered as promising for farming. Aiming future applications in dietary supplementation of fish, this work has cloned and expressed the growth hormone from tambaqui (tGH), using the bacterium Escherichia coli strain BL21 DE3 as a host. For expression of heterologous protein, the synthetic gene tGH (611pb) was initially cloned into pUC19 vector and subsequently inserted into the vector PGSM-1, constructed specifically for this work, giving rise to plasmid PGSM-TGH. Induction of HGT was obtained by cultivating cells of E. coli / PGSM-GHT in the presence of the inducer IPTG (1 mM), where the peak of expression was observed after 4h of induction. Recombinant clones expressed a protein of approximately 24 kDa, similar in size to other works with fish GH. The recombinant tGH was confirmed by polyacrylamide gel electrophoresis SDS-PAGE 15%. The recombinant tGH coli described in this work will be used in ongoing studies, allowing additional characterization. Finally, the recombinant TGH should be further evaluated as a food supplement in the diet of fish, in order to provide greater economic value to the fish farming of tambaqui.
Palavras-chave: Piscicultura
Tambaqui
Hormônio de crescimento
Escherichia coli
Proteína heteróloga
Área(s) do CNPq: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA::GENETICA ANIMAL
Idioma: por
País: BR
Instituição: Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia
Sigla da instituição: INPA
Departamento: Genética, Conservação e Biologia Evolutiva
Programa: Genética, Conservação e Biologia Evolutiva
Citação: SILVA, Suelen Dias da. Clonagem e expressão do hormônio de crescimento de Colossoma macropomum em Escherichia coli.. 2012. 32 f. Dissertação (Mestrado em Genética, Conservação e Biologia Evolutiva) - Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia, Manaus, 2012.
Tipo de acesso: Acesso Aberto
URI: http://localhost:8080/tede/handle/tede/703
Data de defesa: 27-Ago-2012
Aparece nas coleções:Mestrado - (GCBEv)

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